【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

1、样品的运送 —注意防污染、防散漏、防变质

防护包装：液体防漏、冷冻食品防融，一般用减震材料（泡沫材料）和隔热箱（内装干冰以维持<0℃）； 尽快送检：<3小时； 冷冻食品应保持冷冻状态，非冷冻食品保持1～5℃； 填写送检单，内容与标识单相似，有运送人签字。 不能由专人运送的样品，可以托运，但要确保安全。中毒样品或致病菌样品必须专人、专车运送。

检样的接收 :样品的接收 1、查对样品：根据送检单对照样品，要求样、单一致； 2、填表登记：内容与标识相似，注明接收日期等；一般先微检，后化检。 3、分类保藏：冷藏、冷冻或室温。 样品的拒收 样品数量、状态、外形或包装等与送检单不符。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

冷冻样品 :先将中样解冻
在0~4 ℃下解冻，时间不能超过18h，
在45 ℃下解冻，时间不能超过15min。
再取检样25g做稀释处理。

肉与肉制品样品的采集与制备:样品的采取
a、生肉及脏器检样
  屠宰后的畜肉，于开腔后，用无菌刀取两腿内侧肌肉各50g（或劈半后取两侧背最长肌肉各50g）；
 冷藏或销售的生肉，用无菌刀取腿肉或其他部位肌肉100g。
 检样采取后放入无菌容器内，立即送检，不超过3h。送检时应冷藏，不得加入任何防腐剂。检样送往化验室应立即检验或放置冰箱暂存。 

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

食品微生物检验样品的处理

样品必须于无菌室内处理；需解冻的样品应于原容器中解冻，解冻条件为，2-5 ℃温度下不超多15h或45 ℃温度下不超过15min。

一般固体食品的样品处理方法有一下几种：捣碎均质法：100g样品剪碎混匀，取25g于含225mL稀释液的无菌均质杯，8000-10000r/min均质1-2min。此法适用性广。 剪碎振荡法： 100g样品剪碎混匀，取25g于含225mL稀释液和适量直径5mm玻璃珠的稀释瓶，盖紧瓶盖，用力快速振荡50次，振幅不小于40cm。

五、微生物检验员证书相关

（一） 检验前准备 ：(1)准备好所需的各种仪器 如冰箱、恒温水浴箱、显微镜等。 (2)各种玻璃仪器 如吸管、平皿、广口瓶、试管等均需刷洗干净(121℃，20min)或干法(160℃一170℃，2h)灭菌，冷却后送无菌室备用。 (3)准备好实验所需的各种试剂、药品 做好普通琼脂培养基或其他选择性培养基，根据需要分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃的水浴中或保存在4℃的冰箱中备用。

(4)无菌室灭菌 如用紫外灯法灭菌，时间不应少于45min，关灯半小时后方可进入工作；如用超净工作台，需提前半小时开机。必要时进行无菌室的空气检验，把琼脂平板暴露在空气中15min，培养后每个平板上不得超过15个菌落。 (5)检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用 工作人员进入无菌室后．实验没完成前不得随便出入无菌室。

化验室常用检测设备：阿贝折光仪

使用方法 仪器安装：安放在光亮处，应避免阳光的直接照射，以免液体试样受热迅速蒸发，检查棱镜上温度计读数是否符合要求（一般选用20±0.1℃或25±0.1℃）； 加样：旋开测量棱镜和辅助棱镜的闭合旋钮，使辅助棱镜的磨砂斜面处于水平位置，若棱镜表面不清洁，可滴加少量丙酮，用擦镜纸顺单一方向轻擦镜面。待镜面干净后用滴管滴加数滴试样于辅助棱镜的毛镜面上，迅速合上辅助棱镜； 调光：转动镜筒使之垂直，调节反射镜使射光进入棱镜，同时调节目镜的焦距，使目镜中十字线清晰明亮，调节消色散补偿器使目镜中彩色光带消失，再调节读数螺旋，使明暗的界面恰好同十字线交叉处重合； 读数：常用的阿贝折光仪可读至小数点后的第四位，为了使读数准确，一般应将试样重复测量三次，每次相差不能超过0.0002，然后取平均值。

注意事项 注意保护棱镜，清洗时只能用擦镜纸而不能用滤纸等，加样时不能将滴管口触及镜面，对于酸碱等腐蚀性液体不能使用阿贝折光仪； 每次测定时，试样不恩能够加的太多，一般只需加2-3滴即可； 注意保持仪器的清洁，保护刻度盘，每次试验完毕，要在镜面上加几滴丙酮，并用擦镜纸擦干； 读数时，有时在目镜中观察不到清晰的明暗分界线，而是畸形的，这是由于棱镜间未充满液体；若出现弧形光环，则可能是由于光线未经过棱镜而直接照射到聚光镜上； 若待测试样折射率不再1.3-1.7范围内，不能够用阿贝折光仪测定，也看不到明暗分界线。

蛋白质 消化：样品中的含氮有机物经浓硫酸加热消化，硫酸使有机物脱水，有机物炭化生成C；C将硫酸还原为SO2，本身生成CO2；SO2使N还原为NH3，本身则氧化为SO3，而消化过程中生成的H，又加速了NH3的形成。在反应过程中，生成物水和SO3逸出，NH3则与硫酸结合成硫酸铵，留在溶液中。 蒸馏：硫酸铵在碱性条件下，释放出氨。 吸收和滴定：蒸馏过程中放出的氨用硼酸溶液吸收后，用硫酸标准溶液滴定，根据硫酸标准溶液消耗量计算出总氮量，进而算出蛋白质的含量。

蛋白质 注意事项 先小火加热，无泡沫后再加大火力。 10%的氢氧化钠每用3-4次要更换一次，并检查滤网是否堵塞。 蒸馏前检查水、硼酸、氢氧化钠、硫酸是否够用，加硫酸时试剂瓶内的细管不能拿出液面外，以防空气进入。 蒸馏过程中不能打开仪器门。 清洗完毕后用蒸馏水浸泡电极。 抽滤器空转不得超过5分钟。 消化好后及时蒸馏、滴定。

微生物检验员证书

【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/6/1 12:14:51